Система обнаружения iVision™ IHC

Наименование товара

iVision ^TM Poly-HRP Goat Anti-Mouse, Rabbit IgG 

Спецификация упаковки

Использование по назначению

Только для исследовательского использования. iVision ^TM Goat anti-Mouse, Rabbit IgG, конъюгированный с пероксидазой, предназначенный для хромогенного обнаружения целевых антигенов, которые реагируют с предоставленным пользователем первичным антителом на ткани человека. Не рекомендуется заменять реагенты в разных наборах или партиях. 

Эксплуатационные характеристики _ _ 

Было обнаружено, что системы обнаружения являются чувствительными и демонстрируют специфическое связывание с первичным антителом с минимальным или нулевым неспецифическим связыванием. Системы обнаружения iVision ^TM продемонстрировали воспроизводимость и постоянство в рамках одного цикла, между циклами и между партиями. Было определено, что продукты стабильны в течение периодов, указанных тестированием в реальном времени. 

Принцип _

Антигены в тканях и клетках выявляются с помощью иммуногистохимии (ИГХ) в два этапа: связывание первичного антитела и последующее обнаружение этого связывания с помощью системы iVision ^TM Detection. Ткани разрезают и помещают на предметное стекло. Первичное антитело, полученное у мыши, затем наносят для реакции с целевыми антигенами, затем наносят поли-HRP козьи антимышиные антитела, кроличьи IgG для реакции с первичными антителами и, наконец, раствор субстрата/хромогена, такой как DAB или AEC, который под действием пероксидазы превращается в нерастворимый осадок. Вся процедура создает видимый профиль расположения антигенов в срезах тканей или типах клеток. 

Основные компоненты

Козий антимышиный, кроличий IgG, конъюгированный с пероксидазой

Хранилище

Хранить при температуре 2～8℃  в течение 18  месяцев .

Образец требований

Ткани FFPE обычно разрезают на срезы толщиной от 3 до 5 мкм с помощью микротома.  Эти срезы затем монтируются на предметные стекла, покрытые тканевым клеем.

Протокол

1.  Подготовка образцов : Депарафинируйте предметные стекла в ксилоле Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ  в течение 5 минут ; Перенесите предметные стекла один раз через 100%, 100%, 95% , 75%  спирты  на 2 минуты соответственно. Промойте слайды деионизированной водой в течение 30 секунд.

2 . Блокирование : Блокируйте активность эндогенной пероксидазы, инкубируя срезы в 3%  растворе  H ₂ O ₂ при комнатной температуре в течение 5 минут , чтобы  заблокировать активность эндогенной пероксидазы. Промойте слайды деионизированной водой в течение 30 секунд.

3 . Извлечение антигена : Нагрейте буфер для извлечения антигена с ЭДТА до 100 ℃ . Затем поместите предметные стекла в прокипяченный буфер и продолжайте нагревать в течение 15–20 мин . Естественно остыть в течение 30 минут. Промойте образец промывочным буфером.

4 . Инкубация первичных антител: Слейте предметные стекла. Добавьте к ткани первичные антитела , инкубируйте при комнатной температуре в течение  30 минут . (в качестве контроля используйте разбавитель антител или PBS) . Вымойте слайды в PBST 2 раза по 5 минут каждый раз. Если первичное антитело концентрированное, разведите его до RTU (готово к использованию) в соответствии с информацией на упаковке . 

5.  Вторичное антитело  : Слейте предметные стекла. Добавьте козьи антимышиные и кроличьи вторичные антитела  IgG iVision ^TM  Poly-HRP к ткани и инкубируйте при комнатной температуре в течение 20 минут . Промойте предметные стекла в PBST 2 раза по 5 минут каждый раз . 

6. DAB ：Слейте предметные стекла. Добавьте DAB  в ткань и инкубируйте при комнатной температуре в течение 5 мин. Промойте слайды деионизированной водой.

7. Окрашивание гематоксилином : Слейте предметные стекла. Добавьте к ткани гематоксилин и инкубируйте при комнатной температуре в течение 5 минут . Промойте слайды водой. Используйте раствор кислоты для дифференциации . Промойте слайды водой.

8. Обезвоживание : Обезвоживание предметных стекол в 75% , 95% , 100%  спирте в течение 2 минут .  Высушите слайды. Накройте окрашенную ткань покровным стеклом, используя монтажную среду.

Ожидаемые результаты _ _ 

Правильное использование этого реагента приведет к интенсивному и четкому окрашиванию участков антигена как в образце, так и в положительном контроле. Любое отклонение от этих ожидаемых результатов должно заставить пользователей сомневаться в результатах и ​​обращаться за помощью в техническую службу или к местному дистрибьютору.

Меры предосторожности

1.  Пожалуйста, внимательно прочитайте инструкцию и ознакомьтесь со всеми компонентами набора перед использованием. Строго следуйте инструкции во время работы.

2.  НЕ используйте комплект или какой-либо компонент комплекта после их замены.

3.  Только обученные специалисты могут использовать этот комплект. Пожалуйста, надевайте подходящий лабораторный халат и одноразовые перчатки при работе с реагентами.

4.  Избегать попадания химикатов на кожу, глаза и слизистые оболочки.

5.  НЕ пипетировать ртом.

6.  Неиспользованные реагенты, использованный набор и отходы необходимо утилизировать в соответствии с местным законодательством.

Производитель _

Название компании: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd.

Адрес: № 3-й и 4-й этажи, здание B10, № 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Haicang District, Xiamen City, 36100 China

Тел: +86 592 6315755            

Электронная почта : tlsw@talentbiomedical.com                

сайт : www.talentbiomedical.com

Символы